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影片讲述了新生代蜘蛛侠迈尔斯（沙梅克·摩尔 Shameik Moore 配音）携手蜘蛛格温（海莉·斯坦菲尔德 Hailee Steinfeld 配音），穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程的故事。
面临每个蜘蛛侠都会失去至亲的宿命，迈尔斯誓言打破命运魔咒，找到属于自己的英雄之路。而这个决定和蜘蛛侠2099（奥斯卡·伊萨克 Oscar Is aac 配音）所领军的蜘蛛联盟产生了极大冲突，一场以一敌百的蜘蛛侠大内战即将拉响！
酷飒的“机车女骑”蜘蛛女侠、异域风情满满的印度蜘蛛侠、画风“炸裂”的朋克蜘蛛侠纷纷登场，还有熟悉的蜘蛛格温，升级成为新手奶爸的彼得·B·帕克。更有联盟领袖蜘蛛侠2099大杀四方震撼亮相！
身为新生代蜘蛛侠，迈尔斯当然渴望加入联盟。然而成为蜘蛛侠必须面对一项艰难的抉择：救一个人，还是救整个宇宙？
“失去挚爱至亲”几乎成为每一位蜘蛛侠的宿命魔咒，对此迈尔斯立下誓言“我会找到属于自己的路。”决意打破这一残酷循环！
然而这个决定却与蜘蛛联盟的理念相悖。为了维护多元宇宙的稳定，蜘蛛侠2099领军数百位蜘蛛侠对迈尔斯展开围追堵截，一场燃爆大银幕的宇宙级蜘蛛侠内战即将打响！
作为奥斯卡最佳动画长片《蜘蛛侠：平行宇宙》续作，《蜘蛛侠：纵横宇宙》延续了前作潮酷绚丽的鲜明画风，还将呈现多达6种不同宇宙的风格特色，百蛛同框大内战极致丝滑炫目，视听视效全面大升级！
电影的故事延续前作，终极蜘蛛侠迈尔斯·莫拉莱斯穿越多元宇宙踏上更宏大的冒险征程。蜘蛛格温、“蜘蛛本蛛”彼得·帕克等老角色回归。正如预告片所示，这一次他来到的是一个类似核心宇宙的地方，蜘蛛侠2099、蜘蛛女侠，印度蜘蛛侠、朋克蜘蛛侠等来自漫画中的各种著名蜘蛛侠角色炫技登场，上百位精英蜘蛛侠组成“蜘蛛联盟”维护多元宇宙的稳定。
所以本片里上百位精英蜘蛛侠汇聚一堂，从预告片里可以看出，除了前作的街头文化和摇滚文化之外，赛博朋克、潮流游戏、油画艺术风格等多维度的视觉体验，让该片的感官美学达到全新高度。
因为观点不统一，平行宇宙中的所有蜘蛛侠被划分为两大阵营——以迈尔斯、格温、彼得·B·帕克为首的小团队，大战蜘蛛侠2099领军的“蜘蛛联盟”，不得不同室操戈，展开了一场对决。从定档预告片里我们可以看出，无数个蜘蛛侠大战的场面仿佛进入盘丝洞，“群蛛乱舞”的场面在电影奇异的视觉效果下更是格外养眼。从某种角度上而言，电影也拥有了“英雄大乱斗”的附加值体验，将角色的丰富性与世界观格局进行额外的拓展，令粉丝一本满足，更令模型厂商喜笑颜开（HT&万代：又有这么多蜘蛛侠手办可以出了）
值得一提的是，预告片的彩蛋让人眼前大亮。其中蜘蛛侠们不但还原了“蜘蛛侠互指”的名场面，甚至平行宇宙里也包括MCU电影宇宙。比如荷兰弟版蜘蛛侠无辜被cue——蜘蛛侠2099说道，“我可不想提奇异博士和那个199999宇宙（漫威电影宇宙）的书呆子！”这是跨宇宙的攻击！那么说。托比版蜘蛛侠，加菲版蜘蛛侠、荷兰弟版蜘蛛侠和迈尔斯“四代蜘蛛侠”联动呼应？这个真的可以有！
相信《蜘蛛侠：纵横宇宙》也是如此，如果你的荷尔蒙还有剩余，就应该像蜘蛛侠一样，请尽情地挥洒，跟随恰到好处的配乐，给跃动绚丽的画面和角色穿上了一身最贴合的蜘蛛侠战服，让观众不甘心只停留在电影院座位上，也想跟着里面上蹿下跳的蜘蛛侠们一起飞檐走壁，去做一回拯救自己绝望小世界的英雄！